【通蔚生物】 ：你未必知道的ELISA實驗秘訣

只有不斷學(xué)習(xí)與實驗才能逐漸積累經(jīng)驗，做出更好的實驗效果。在前面的資xun內(nèi)容及技術(shù)文章中，上海通蔚為大家分享許多ELISA試劑盒的操作技巧、要求、方法等相關(guān)技術(shù)，我公司技術(shù)員根據(jù)自身多年【ELISA試劑盒實驗】經(jīng)驗，整理出的ELISA操作技巧。

下面我們一起來看下具體內(nèi)容，你未必知道的32條ELISA實驗秘訣：

1.加樣后及時放人孵箱，標本較多時，要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間，防止孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗徹底。

2.顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。

3.加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。

4.合理安排檢測量，以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。

5.液體全部加入酶標孔后，將酶標板放在桌子上平行輕輕搖晃30s，使液體充分混合均勻，也使其得到充分的反應(yīng)。

6.洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可經(jīng)久保存。

7.吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

8.要盡量做雙孔實驗，這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準確性，又能反映出試劑盒的精密度。

9.為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標板加上蓋或覆膜。

10.未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復(fù)使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液。

11.作時必須戴手套，穿工作衣，嚴格健全和執(zhí)行消毒隔離制度。

12.試驗結(jié)果的判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。

13.ELISA試劑盒樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注，并經(jīng)常校對其準確性。

14.剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘，或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。

15.不同批號試劑組分不得混用。