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品質(zhì)保證 · 通蔚試劑

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最新產(chǎn)品

  • 人卵巢上皮細(xì)胞

    規(guī)格:
    價(jià)格:
    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號(hào) : TW32023
    • 應(yīng)用 : 僅供科研使用
    • 貨期 : 現(xiàn)貨
    • 規(guī)格 :5×10?Cells
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
產(chǎn)品名稱 :人卵巢上皮細(xì)胞
產(chǎn)品品牌 :通蔚生物
組織來(lái)源 :卵巢組織
產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡(jiǎn)介
人卵巢上皮細(xì)胞分離自卵巢組織。卵巢是雌性動(dòng)物的生殖器官,卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側(cè)發(fā)育(右側(cè)已退化) ,呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時(shí)期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動(dòng)物有兩個(gè)卵巢,但是部分魚類的兩個(gè)卵巢融合為單個(gè)結(jié)構(gòu),而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機(jī)能。

卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對(duì)卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成。髓質(zhì)位于中央,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。
卵巢上皮細(xì)胞主要功能:
① 上皮細(xì)胞能分泌激素,刺激卵細(xì)胞分化成熟。
② 細(xì)胞能分泌炎癥介質(zhì),參與炎癥反應(yīng)。

方法簡(jiǎn)介
通蔚生物實(shí)驗(yàn)室分離的人卵巢上皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶 。

質(zhì)量檢測(cè)
通蔚生物實(shí)驗(yàn)室分離的人卵巢上皮細(xì)胞經(jīng)C ytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息
包被條件 :鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm 2) 
培 養(yǎng)  基 :含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 :貼壁 
細(xì)胞形態(tài) :上皮細(xì)胞樣 
傳代特性 :可傳2-3代 
傳代比例 :1:2
消 化  液 :0. 25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%
人卵巢上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片

使用方法
人卵巢上皮細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)呈上皮細(xì)胞樣,在通蔚生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細(xì)胞可傳2-3代。建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0. 1m g/m l),明膠(0. 1% ),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被。

注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和通蔚生物技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。

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