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品質保證 · 通蔚試劑

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產(chǎn)品中心

最新產(chǎn)品

  • 人子宮成纖維細胞

    規(guī)格:
    價格:
    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號 : TW32020
    • 應用 : 僅供科研使用
    • 貨期 : 現(xiàn)貨
    • 規(guī)格 :5×10?Cells
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產(chǎn)品簡介
產(chǎn)品名稱 :人子宮成纖維細胞
產(chǎn)品品牌 :通蔚生物
組織來源 :子宮組織
產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T 25細胞培養(yǎng)瓶

細胞簡介
人子宮成纖維細胞分離自子宮組織。子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結構維持,這些結構受損或松弛時,可以引起子宮脫垂。

成纖維細胞(Fibroblast) 是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化。成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。

剛分離的子宮成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起。6h后細胞基本貼壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團。細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。

細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀。細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
子宮成纖維細胞的主要特征:
① 是子宮的重要細胞組成,在體外易于培養(yǎng)。
② 在子宮損傷后能修復和重塑子宮。
③ 在子宮炎癥時能有效控制炎癥擴散。

方法簡介
通蔚生物實驗室分離的人子宮成纖維細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶 。

質量檢測
通蔚生物實驗室分離的人子宮成纖維細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息
培 養(yǎng)  基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態(tài) :成纖維細胞樣
傳代特性 :可傳5代左右。3代以內狀態(tài)最佳
傳代比例 :1:2
消 化  液 :0. 25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%
人子宮成纖維細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

使用方法
人子宮成纖維細胞是一種貼壁細胞,細胞形態(tài)呈成纖維細胞樣,在通蔚生物技術部標準操作流程下,細胞可傳5代左右。3代以內狀態(tài)最佳。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0. 1m g/m l),明膠(0. 1% ),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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