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021-54845833/15800441009
細胞信息
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細胞名稱 |
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細胞品牌 |
通蔚生物 |
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種屬來源 |
人 |
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組織來源 |
外周血 |
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生長特性 |
懸浮培養(yǎng) |
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細胞形態(tài) |
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細胞簡介 |
naive T cell，也稱作未致敏T細胞，在胸腺中發(fā)育成熟遷移至外周淋巴組織中（如脾臟、淋巴結(jié)）。其未接觸抗原刺激前處于相對靜止?fàn)顟B(tài)，在胸腺中發(fā)育的一類帶有CD4、TCR/CD3、CD28、CD62L、CCR7等表面分化抗原的T細胞。其通過抗原刺激或樹突狀細胞（Dendritic cell，DC）的遞呈作用，可進一步分化成Th1細胞、Th2細胞、Th17細胞、調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）、效應(yīng)T細胞等。 |
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質(zhì)量檢測 |
CD3，CD45RA免疫熒光染色為陽性，純度高于 90%，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等 |
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細胞規(guī)格 |
5x10?cells/T25或1mL凍存管 |
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培養(yǎng)基 |
人原代 Naive T cell細胞專用培養(yǎng)基 |
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培養(yǎng)條件 |
氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ |
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換液頻率 |
每2-3天換液一次 |
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消化液 |
0.25%胰蛋白酶 |
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細胞貨期 |
7-8周左右 |
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發(fā)貨方式 |
復(fù)蘇發(fā)貨（免運輸費用）/ 凍存發(fā)貨（需加干冰運輸費用） |
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供應(yīng)范圍 |
僅限于科研實驗使用，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 |
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特別說明 |
具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主 |
細胞培養(yǎng)操作
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收貨處理 |
取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài) |
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傳代密度 |
細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng) |
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傳代比例 |
首次傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 |
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傳代方法
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1. 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次； 2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化； 3. 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)； 4. 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的完全培養(yǎng)基。 |
注意事項
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重要提醒 |
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。 2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。 3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。 4. 運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 |
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到貨須知 |
1. 收到細胞后，首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否完全揮發(fā)，細胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。 2. 靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照（當(dāng)天以及第 2,3 天請拍照），記錄細胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。 3. 由于運輸?shù)脑?，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 4. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。 |
售后服務(wù)
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細胞予重發(fā) |
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1. 細胞運輸中遭遇的各種問題，細胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā)。 |
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2. 收到細胞未開封，如出現(xiàn)污染狀況，重發(fā)。 |
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3. 收到細胞3天內(nèi)，發(fā)現(xiàn)污染問題，經(jīng)核實后，重發(fā)。 |
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4. 常溫發(fā)貨細胞靜置2小時后，干冰凍存發(fā)貨細胞復(fù)蘇2天后，絕大多數(shù)細胞未存活，經(jīng)核實后，重發(fā)。 |
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5. 常溫發(fā)貨的細胞靜置22小時且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇2天后，出現(xiàn)污染經(jīng)核實后，重發(fā)。 |
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6. 細胞活性問題在收到產(chǎn)品3天內(nèi)提出真實實驗結(jié)果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，經(jīng)核實后，重發(fā)。 |
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細胞不予重發(fā) |
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1. 客戶操作造成細胞污染，不重發(fā)。 |
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2. 客戶嚴(yán)重操作失誤致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。 |
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3. 非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。 |
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4. 細胞狀態(tài)不好，未提供真實清晰的培養(yǎng)前3天的細胞狀態(tài)照片，不重發(fā)。 |
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5. 細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題的，不重發(fā)。 |
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6. 收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的，不重發(fā)。 |
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特別說明 |
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上海通蔚生物客戶在細胞培養(yǎng)過程中，有任何技術(shù)問題可以撥打免費服務(wù)電話021-54845833或15800441009，我們隨時給予實驗中的免費解答。 |
