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產(chǎn)品中心

  • HELA-LUC/人宮頸癌細胞-熒光素酶標記(STR鑒定正確)

    規(guī)格:
    價格:
    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號 : TW-CC3799
    • 應用 : 僅供科研使用
    • 貨期 : 現(xiàn)貨
    • 規(guī)格 :1×10?cells/T25瓶或1mL凍存管
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細胞基本信息

細胞名稱

HELA-LUC/人宮頸癌細胞-熒光素酶標記(STR鑒定正確)

TW-CC3799

細胞品牌

通蔚生物

種屬來源

組織來源

生長特性

貼壁生長

細胞形態(tài)

上皮細胞樣

活性檢測報告

HELA-LUC報告下載

細胞簡介

Luciferase HELA細胞穩(wěn)定表達螢火蟲熒光素酶。該細胞株性狀穩(wěn)定,培養(yǎng)時不需要添加抗生素維持??捎米魑灮鹣x熒光素酶活性檢測中的陽性對照,也可用于活體動物成像實驗。該細胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。Hela細胞是第一個來自人組織和連續(xù)培養(yǎng)維持非整倍體上皮樣細胞系。Hela細胞是由G·D·Gey等在1951年從31歲女性黑人的宮頸癌建立。經(jīng)原始組織切片樣品的重新觀察,Jones等將其診斷為腺癌。已知該細胞系含有人乳頭狀瘤病毒18序列,需在2級生物安全防護臺操作。Hela細胞角蛋白陽性,p53表達量較低,但表達正常水平的Prb(視網(wǎng)膜母細胞瘤抑制因子)。

puro藥篩濃度

HELA-LUC細胞puro藥篩濃度為1.0ug/ml,培養(yǎng)過程中可不用再添加puro,如若擔心抗性隨著傳代時間降低,可定期用0.5ug/ml濃度puro維持

保藏機構(gòu)

ATCC; CRL-1690 ECACC; 92090213 JCRB; IFO50303 JCRB; JCRB9041 KCLB; 21690 RCB; RCB1954

生物安全等級

1

細胞規(guī)格

1x10?cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管

培養(yǎng)基

90% MEM+10% FBS+PS

培養(yǎng)條件

氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

凍存條件

無血清凍存液,液氮儲存

細胞貨期

現(xiàn)貨,1周左右

發(fā)貨方式

復蘇發(fā)貨(T25瓶免運輸費用)/  凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用)

供應范圍

僅限于科研實驗使用,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用


細胞培養(yǎng)操作

T25瓶

收貨處理

觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁,將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)

傳代密度

細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)

傳代比例

首次傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿

傳代方法

a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,棄去消化液,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

c、按6-8 mL/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心4 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

d、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

注意事項

1.運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。

2.因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。

凍存管

收貨處理

收到細胞后,需立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復蘇

傳代密度

第二天換液并檢查細胞密度

傳代比例

一管細胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶

傳代方法

將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。


注意事項

1.收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細胞接種觀察,若未融化可以將細胞按正常步驟保存。

2.為保證細胞的高存活率,收到產(chǎn)品后,請立即解凍復蘇細胞。


細胞凍存操作

凍存液配方

無血清凍存液,液氮儲存

細胞密度

待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例

凍存方法

a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數(shù)。

b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5x106~1x107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。

c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

注意事項

凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實驗方案


售后服務

細胞予
重發(fā)

1.細胞運輸中遭遇的各種問題,細胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā)。

2.收到細胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā)。

3.收到細胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實后,重發(fā)。

4.常溫發(fā)貨的細胞靜置2小時后,干冰凍存發(fā)貨細胞復蘇2天后,絕大多數(shù)細胞未存活,經(jīng)核實后,重發(fā)。

5.常溫發(fā)貨的細胞靜置22小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇2天后,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實后,重發(fā)。

6.細胞活性問題,請在收到產(chǎn)品3天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,經(jīng)核實后,重發(fā)

細胞不予
重發(fā)

1.客戶操作造成細胞污染,不重發(fā)

2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā)。

3.非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā)

4.細胞狀態(tài)不好,未提供真實清晰的培養(yǎng)前3天的細胞狀態(tài)照片,不重發(fā)。

5.細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導致細胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā)。

6.收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā)

特別說明

上海通蔚生物客戶在細胞培養(yǎng)過程中,有任何技術(shù)問題可以撥打免費服務電話 : 021-54845833 ,我們隨時給予實驗中的免費解答。


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